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消毒灭菌的实验步骤有哪些呢?

2019-11-30

干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160~170℃),时间长 (1~2h)。但干热灭菌温度不能超过 180℃。否则,包器皿的纸或棉塞就会烧焦,甚至引起燃烧。

灭菌的原理就是使蛋白质和核酸等生物大分子发生变性,从而达到灭菌的作用,实验室中常用的就是干热灭菌和湿热灭菌。灭菌是指杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽孢的过程。消毒是指用物理、化学或生物的方法杀死病原微生物的过程。

消毒灭菌实验步骤

高压蒸气灭菌:首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。

放回内层锅,并装入待灭菌物品 (培养基等)。注意不要装得太挤,以免防碍蒸气流通而影响灭菌效果,三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透人棉塞。加盖,并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺拴,使螺栓松紧一致,勿使漏气。

消毒灭菌的实验步骤有哪些呢?

用电护或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸气压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所得压力时,控制热源,维持压力至所需时间。灭菌所需时间到后,切断电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降至“0”时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。

干热灭菌: 装入待灭菌物品;将包好的待灭菌物品(培养皿,试管,吸管等)放入电烘箱内,关好箱门。

升温:接通电源,拨动开关,打开电烘箱排气孔,旋动恒温调节器至绿灯亮,让温度逐渐上升。当温度升至 100℃时,关闭排气孔。在升温过程中,如果红灯熄灭,绿灯亮,表示箱内停止加温,此时如果还未达到所需的 160~170℃温度,则需转动调节器使红灯再亮,如此反复调节,直至达到所需温度。

恒温:当温度升到 160~170℃时,借恒温调节器的自动控制,保持此温度 2h。

降温:切断电源、自然降温。

开箱取物:待电烘箱内温度降到 70℃以下后,打开箱门,取出灭菌物品。

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